菌粉成品图片,大概还是需要研磨的。
取少许菌粉涂板。好像落入杂菌了。。。
(应该稀释后涂布,这样可以计数)
材料准备
名称 | 单位 | 备注 |
100mL 锥形瓶 | 5 (只) | 窄口 |
250mL 锥形瓶 | 1 (只) | 固体培养基灭菌,宽口 |
90mm 一次性培养皿 | 10(套) | EO灭菌 |
移液枪 | 1 (把) | 100uL - 1mL |
配方
营养琼脂 No.2 [NA(II)] | 用量 (g/L) | 备注 |
蛋白胨 | 15 | |
酵母浸粉 | 3.0 | |
葡萄糖(无水) | 1 | |
氯化钠 | 6 | |
琼脂粉 | 15 | 液体培养基不包括琼脂 |
发酵优化培养基(精细) [(F)BL-II] | 用量 (g/L) | 备注 |
大豆蛋白胨 | 5 | |
硫酸锰(一水) | 0.5 | |
葡萄糖(无水) | 10 | |
NaCl | 4.5 |
发酵优化培养基(粗加工) [(F)BL-I] | 用量 (g/L) | 备注 |
黄豆粉 / 玉米粉 | ~15 | 需重新计算总氮、总碳 |
红糖 | ~5 | 经验值,批次差异较大 |
前期准备
> 准备5个营养琼脂平板,然后将菌粉(或琼脂斜面)活化后涂板。
(枯草芽孢杆菌的典型菌落)
制备营养肉汤(也就是不加琼脂的营养琼脂),121°C高压灭菌10分钟,待冷却后接种单菌落一环;37°C培养24小时,有条件应使用摇床。培育后即得可用的菌液,剩余部分应放入4°C冰箱保存。
方法一(固体培养基)
100mL锥形瓶装入25mL发酵优化培养基(固体),加入少许菌液覆盖琼脂表面,37°C培养48小时。
培养基表面覆盖着一层厚厚的菌苔,用适量生理盐水洗下,准备制成菌粉。
方法二(液体培养基)
100mL锥形瓶装入25mL发酵优化培养基(液体),接种5%的菌液,摇瓶发酵48小时。用此种方法活菌数可达1x109/mL量级(不精确,因为移液枪还在路上)
吸附方法
(1)按照菌液:蒙脱石散1:3混匀,60°C烤箱干燥至恒重。优点:制剂较为纯净,可以达到食品级;缺点:成本很高
(2)按照菌液:淀粉1:5混匀,40°C干燥(不可高温,淀粉会糊化)。优点:很便宜,也比较纯净;缺点:活菌数低
(3)按照菌液:玉米芯粉(60~80目)1:1混匀,60°C干燥。优点:成本低,干燥快;缺点:杂质多,适合农田生防
主要参考这篇专利:
[修改于 2年7个月前 - 2022/04/22 19:49:57]
2022/04/22:更新为教程格式。
下一篇估计做玉米芯粉+纤维素酶酿酒(玉米芯粉买多了)
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