冷却时开着紫外线灯会不会导致菌体突变什么的
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生物防治用地衣、枯草芽孢杆菌固体菌粉的制备（教程向）
中文摘要
地衣芽孢杆菌是一种益生菌，无明显毒理作用，且可以形成芽孢，适合做入门级别的微生物研究。本文以取自OTC药物“整肠生”中的地衣芽孢杆菌为菌种，利用液体、固体培养基进行了简单的培育实验，并制成菌粉。
材料准备
| 名称 | 单位 | 备注 |
| 100mL 锥形瓶 | 5 （只） | 窄口 |
| 250mL 锥形瓶 | 1 （只） | 固体培养基灭菌，宽口 |
| 90mm 一次性培养皿 | 10（套） | EO灭菌 |
| 移液枪 | 1 （把） | 100uL - 1mL |
配方
| 营养琼脂 No.2 [NA(II)] | 用量 (g/L) | 备注 |
| 蛋白胨 | 15 | |
| 酵母浸粉 | 3.0 | |
| 葡萄糖（无水） | 1 | |
| 氯化钠 | 6 | |
| 琼脂粉 | 15 | 液体培养基不包括琼脂 |
| 发酵优化培养基（精细） [(F)BL-II] | 用量 (g/L) | 备注 |
| 大豆蛋白胨 | 5 | |
| 硫酸锰（一水） | 0.5 | |
| 葡萄糖（无水） | 10 | |
| NaCl | 4.5 |
| 发酵优化培养基（粗加工） [(F)BL-I] | 用量 (g/L) | 备注 |
| 黄豆粉 / 玉米粉 | ~15 | 需重新计算总氮、总碳 |
| 红糖 | ~5 | 经验值，批次差异较大 |
前期准备
> 准备5个营养琼脂平板，然后将菌粉（或琼脂斜面）活化后涂板。
（枯草芽孢杆菌的典型菌落）
制备营养肉汤（也就是不加琼脂的营养琼脂），121°C高压灭菌10分钟，待冷却后接种单菌落一环；37°C培养24小时，有条件应使用摇床。培育后即得可用的菌液，剩余部分应放入4°C冰箱保存。
方法一（固体培养基）
100mL锥形瓶装入25mL发酵优化培养基（固体），加入少许菌液覆盖琼脂表面，37°C培养48小时。
培养基表面覆盖着一层厚厚的菌苔，用适量生理盐水洗下，准备制成菌粉。
方法二（液体培养基）
100mL锥形瓶装入25mL发酵优化培养基（液体），接种5%的菌液，摇瓶发酵48小时。用此种方法活菌数可达1x109/mL量级（不精确，因为移液枪还在路上）
吸附方法
（1）按照菌液：蒙脱石散1:3混匀，60°C烤箱干燥至恒重。优点：制剂较为纯净，可以达到食品级；缺点：成本很高
（2）按照菌液：淀粉1：5混匀，40°C干燥（不可高温，淀粉会糊化）。优点：很便宜，也比较纯净；缺点：活菌数低
（3）按照菌液：玉米芯粉（60~80目）1：1混匀，60°C干燥。优点：成本低，干燥快；缺点：杂质多，适合农田生防
主要参考这篇专利：
[修改于 2年8个月前 - 2022/04/22 19:49:57]
菌粉成品图片，大概还是需要研磨的。
取少许菌粉涂板。好像落入杂菌了。。。
（应该稀释后涂布，这样可以计数）
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2022/04/22：更新为教程格式。
下一篇估计做玉米芯粉+纤维素酶酿酒（玉米芯粉买多了）
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楼主不搞点penicillin的制备试试，受楼主影响和亿点点买药期间的小刺激，我开始培养了，我现在在捂橘子皮，等着烂
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