1·Brachet反应原理
利用核酸分子上的磷酸根和碱性染料形成盐键而在原位沉淀显色的原理,根据DNA和RNA对碱性染料的亲合力有差别,用Unna试剂进行选择性染色是显示核酸的方法之一。在Unna试剂中甲基绿与空间构型完整的DNA亲和力高,并且甲基绿分子中的两个含N基团带正电荷正好与DNA分子的负电基团相结合,这样DNA被Unna试剂中的甲基绿染成绿色或蓝绿色。而RNA则被Unna试剂中的派咯宁(Pyronin G )染成红色。
2·步骤
1、按1:1的比例把甲基绿和派咯宁混合,配成Unna试剂
2、撕取洋葱鳞茎内表皮一块置载玻片上;
3、加一滴Unna试剂,染30min;
4、用自来水冲洗1次,加上盖玻片,用滤纸吸干水分,镜下观察。
5、在显微镜下可观察到DNA所在的核和染色体染成绿色或蓝绿色,含有大量RNA的核仁呈鲜红色,含有RNA的细胞质呈淡红色。
3·结论
DNA主要集中在细胞核中。RNA主要集中在细胞核中的核仁和细胞质中。